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人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/5/14瀏覽:71次
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  以下是關(guān)于人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-0195  人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法檢測樣本中FⅧAg含量。具體步驟為:

  用純化抗體包被微孔板形成固相抗體

  依次加入待測樣本和HRP標(biāo)記抗體

  形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物后,TMB顯色系統(tǒng)產(chǎn)生顏色反應(yīng)

  二、試劑盒組成

  典型配置包含(不同品牌可能略有差異):

  酶標(biāo)包被板(96T/48T)

  FⅧAg標(biāo)準品(通常含40μg/ml原液)

  酶標(biāo)試劑(HRP標(biāo)記抗體)

  顯色液(TMB A/B液)

  終止液(酸性溶液)

  20×濃縮洗滌緩沖液

  三、樣本要求

  適用樣本類型:人血清、血漿及相關(guān)液體樣本

  保存要求:

  新鮮樣本需立即檢測

  凍結(jié)樣本應(yīng)充分混勻后使用

  避免反復(fù)凍融和細菌污染

  四、操作步驟

  標(biāo)準品稀釋?:用標(biāo)準品稀釋緩沖液進行梯度稀釋

  加樣?:

  每孔加入100μl標(biāo)準品或樣本

  37℃溫育90分鐘

  洗滌?:棄液體后用洗滌液洗板5次

  加酶標(biāo)抗體?:每孔加100μl HRP標(biāo)記抗體

  顯色?:

  加入TMB顯色液(A+B液等體積混合)

  避光反應(yīng)15-30分鐘

  終止?:每孔加50μl終止液

  檢測?:450nm波長讀取OD值

  五、結(jié)果計算

  以標(biāo)準品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準曲線

  通過回歸方程計算樣本濃度(需乘以稀釋倍數(shù))

  六、注意事項

  試劑使用前需平衡至室溫(25-37℃)

  嚴格避免:

  不同批次試劑混用

  顯色液接觸金屬器具

  酶標(biāo)板干燥

  質(zhì)量控制:

  建議所有樣本做雙孔檢測

  每板設(shè)置空白對照

  安全防護:

  避免直接接觸終止液和顯色液

  禁止用嘴吸取試劑

  七、儲存條件

  未開封試劑盒應(yīng)保存于2-8℃;開封后酶標(biāo)板需密封保存并添加干燥劑。

  (注:具體操作參數(shù)請以實際試劑盒說明書為準,不同廠家可能存在差異,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術(shù)老師及供應(yīng)商)。

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